Жидкостная цитология. цитологическое исследование биоматериала шейки матки (окрашивание по папаниколау, технология thinprep)

Диагностические возможности

Жидкостной цитологический скрининг направлен на выявление разнообразных клеточных атипий, что показывает наличие у женщины предракового состояния или рака шейки матки. Однослойность и однородность цитопрепарата обеспечивают высокую степень визуализации, позволяя врачу-лаборанту достоверно определять характер изменений. Это минимизирует вероятность диагностических ошибок и ложноотрицательных результатов.

Наличие суспензии и ее достаточный объем позволяют по показаниям дополнительно проводить другие исследования:

• анализ на онкомаркеры;
• любые ПЦР-исследования;
• ВПЧ-тестирование;
• иммуноцитохимические исследования с определением маркеров пролиферации.

Но жидкостная цитология не позволяет диагностировать воспалительные состояния, ведь обязательный этап фильтрации удаляет из суспензии детрит, лейкоциты и другие примеси. Поэтому при подозрении на цервицит и кольпит целесообразно параллельное взятие традиционного мазка на онкоцитологию. Это является существенным недостатком методики.

Тем не менее, жидкостная цитология по Папаниколау рекомендуется ВОЗ, FDA и мировыми противораковыми сообществами в качестве «золотого стандарта» для ранней диагностики рака шейки матки. Но в настоящее время в РФ при проведении скрининга чаще всего используется все же традиционный мазок на онкоцитологию. Это связано в основном с недостаточным техническим оснащением поликлинического звена и отсутствием должной квалификации у врачей. Жидкостное цитологическое исследование пока производится преимущественно крупными частными лабораториями: Гемотест, Инвитро и другими.

Расшифровка результатов анализа

Расшифровка результатов на жидкостную цитологию заключается в определении характеристик эпителиальных клеток, содержащихся в образце материала. В соответствии с этими показателями делают заключение о различной стадии заболевания:

Цифра 1 означает нормальное состояние организма, то есть ничего необычного в характеристиках эпителиальных клеток не выявлено исследованием;

2 – выявлен недостаток концентрации определенных клеточных элементов. Это дает возможность сделать предположение о развитии воспалительных процессов, спровоцированных вирусной инфекцией. Для подтверждения диагноза нууно пройти более глубокое обследование;

3 – выявлена патология в малом процентном соотношении. Требуется дополнительное обследование;

4 – обнаружены следы онкологии, стадия заболевания классифицируется как предраковая;

5 – выявлено значительное количество зараженных клеток, что характерно для начального этапа развития ракового заболевания.

Результат анализа представляется пациенту как таблица содержания элементов, выявленных в клетке микробиологическим исследованием. Расшифровка результатов упрощается за счет использования международной системы Бетесда, которая предполагает одинаковую запись полученных показателей, сравненных с нормальными, для различных лабораторий.

• ASC-US – выявлены атипичные эпителиально плоские клетки; Такое часто встречается у женщин среднего возраста и связано с падением содержания женского гормона;
• AGC – Ненормальный результат. Найдены патологии в клетках желез, что указывает на развитие воспалительных процессов в половых органах;
• LSIL – выявлено незначительное содержание атипичных клеток не онкологической формации;;
• ASC-H – предраковое состояние либо начальная фаза заболевания раком;
• HSIL – Найдены клетки плоского эпителия в большом количестве, прогнозируется раковое заболевание;
• AIS – найдены цилиндрические клетки, значит, у пациенты проблемы онкологического характера.

Подготовка

Подготовка к обследованию заключается в следующем:

• за 48 ч необходимо исключить половые контакты;
• за 3 дня – не пользоваться влагалищными формами лекарств (вагинальные таблетки, свечи, мази, кремы, спермициды, лубриканты, тампоны);
• за 2 недели – исключить прием противовирусных средств (по согласованию с врачом);
• за 2 дня – прекратить спринцевания.

Также должны отсутствовать менструальные кровотечения, то есть после окончания месячных должно пройти не менее 5 дней.

В тот день, когда планируется посещение гинеколога, необходимо предварительно произвести гигиенические процедуры без использования мыла и гелей, а также записать дату последних месячных и среднее количество дней в менструальном цикле. Эти данные врач внесет в направление на цитологическое исследование. Волосы сбривать на наружных половых органах необязательно.

Проведение

Забор биоматериала для исследования производится следующим образом:

1. Проводится предварительная дезинфекционная обработка – врач моет руки с мылом, смачивает их в дезинфекционном растворе, затем надевает стерильные перчатки.
2. На гинекологическое кресло помещают стерильную одноразовую салфетку.
3. Пациентка укладывается на спину в гинекологическом кресле, в положении с отведенными и согнутыми в коленях ногами (их укладывают на ногодержатели).
4. Производится обработка наружных половых органов и внутренней поверхности бедер стерильным ватным шариком, закрепленным в цанге-держателе, под непрерывной струей дезинфицирующего раствора. Затем немного обсушивают эти поверхности.
5. Пальцами левой руки врач раздвигает малые половые губы и осматривает преддверие влагалища.
6. Затем во влагалище вводится створчатое зеркало Куско в сомкнутом виде на всю глубину (металлическое многоразовое или пластиковое одноразовое).
7. Створки раскрываются и фиксируются с помощью винта.
8. Производится осмотр шейки матки.
9. Инструментом с закругленными краями или сухим ватным тампоном удаляют излишки слизи, не оказывая значительного давления на шейку матки во избежание потери эпителия.
10. Вводится специальная одноразовая, стерильная цитощетка (комбинированной конструкции с эндоцервикальным компонентом или забор производится двумя отдельными щетками). Использование инструментов старого образца (кюретажные ложечки, деревянные и металлические шпатели) приводит к снижению достоверности исследования.
11. Проворачивают щетку 3-5 раз по часовой стрелке на 360°. Возможно появление капелек крови на слизистой шейки матки, это неопасно и безболезненно. Целью забора биоматериала является получение среза со всех слоев эпителия. Образец, полученный таким способом, будет наиболее насыщен клетками.
12. Щетку извлекают из влагалища и помещают биоматериал в транспортировочный раствор и флакон.
13. Цитощетка полностью утилизируется, крышку транспортировочного флакона закручивают, маркируют его, заполняют направительный бланк и отправляют в лабораторию.

Вся дальнейшая обработка клеточной суспензии производится в лаборатории. При компьютеризированном анализе приготовление мазков происходит автоматизированно. Это позволяет сократить сроки получения результатов. Компьютерная система производит первичный отбор образцов, в которых нет аномальной картины. В сомнительных случаях производятся дополнительные исследования.

Жидкостная цитология, по сравнению с традиционным цитологическим исследованием шейки матки, обладает следующими преимуществами:

• получение стандартизованных образцов высокого качества;
• отсутствие значительного загрязнения биологического материала эритроцитами, элементами воспаления;
• более равномерное распределение на стекле;
• снижение числа неадекватных мазков на порядок;
• сокращение времени для исследования и интерпретации мазка;
• высокая информативность и точность (порядка 90%);
• возможность использования остатков клеточной жидкости для других тестов;
• относительно невысокая цена (порядка 1000 руб. в платных лабораториях).

Результаты анализа в платных лабораториях могут быть готовы в течение 1-3 дней, в государственных бюджетных медицинских учреждениях этот срок достигает 2-3 недель.

Преимущества метода

Жидкостная цитология является одним из ведущих методов диагностики раковых и предраковых состояний в гинекологии. По сравнению с другими методами исследования цитологических и гистологических образцов шейки матки, жидкостная цитология имеет ряд преимуществ:

• более высокое качество и сохранение целостности отобранных культур клеток. Это обеспечивается специализированным стабилизирующим раствором, в который помещают биоматериал перед микроскопированием;
• простота и быстрота подготовки цитологического мазка. Специальная аппаратура позволяет проводить стабилизацию и промывание сразу нескольких образцов;
• метод позволяет окрашивать клетки в разных техниках, что дает возможность обнаружить различные вирусы, патогенные бактерии и инфекции, онкомаркеры;
• подготовительные этапы жидкостной цитологии, а именно промывка и стабилизация препаратов, в несколько раз повышают информативность и точность мазков. Это достигается путем удаления слизи, крови и других выделений, а также отмывки образца от разрушенных клеток эпителия шейки матки;
• образцы могут долго храниться как в лаборатории, так и при транспортировке в другое медицинское учреждение;
• с помощью жидкостной цитологии можно получать монослойные культуры клеток. Это позволяет специалисту более детально и объективно оценить клеточное окружение, особенности структуры и строения клеток, а также предположить наличие злокачественных опухолей.

Жидкостная цитология в настоящее время считается наиболее информативным, безопасным, быстрым и точным видом диагностики рака шейки матки. С помощью этого метода можно максимально точно определить структуру клеток, изменения в них, а также обнаружить воспалительные или инфекционные процессы, происходящие в половых органах женщины.

Негативные результаты

Такого рода результаты необязательно говорят об онкологии. Может быть это дисплазия, у которой есть несколько степеней развития:

• При легкой степени воспаление имеется, но протекает без явных проявлений.
• При умеренной степени онкология возможна.
• Тяжелая степень говорит о том, что шейка матки находится в предраковом состоянии.

Поэтому так важна жидкостная цитология. Расшифровка анализа проведена, результат не очень хороший, что дальше?

Расшифровка результатов анализа для врача – дело простое, для пациента – это непонятные буквы и термины.

• Латинские буквы U, C, V – условное обозначение забора секрета из уретрального, цервикального канала и влагалища соответственно. Количество лейкоцитов – нормой считается число до 15 ед. Наличие трихомонад, гонококков, грибков говорит об инфекции половых органов, которую нужно лечить. Гарднереллы в сочетании с мицелием грибов являются признаками вагинального кандидоза, который может стать причиной воспаления. Наличие железистого, плоского, цилиндрического эпителия в большом количестве с признаками атрофии, патологического изменения говорит о возможных признаках развития онкозаболевания. Такие клетки тщательно изучаются и подробно описываются в комментариях. Устанавливается тип, характер изменений. Степень чистоты – 1, 2 степень говорит о хорошей влагалищной среде, 3, 4 требует дополнительного исследования и лечения. Плоский эпителий в норме составляет до 10 ед. Превышение говорит о возможном заболевании гиперкератозом – доброкачественном образовании шейки матки. Слизь в умеренном количестве – нормальное состояние влагалищной среды.

Если в мазке будут найдены атипичные клетки, в заключении лаборант напишет об этом, а также определит тип изменений. Поэтому, если расшифровка мазка на цитологию не содержит особых примечаний, то, скорее всего, никаких патологий не обнаружено.

Цитограмма считается нормальной если в результатах анализов не было найдено атипичных клеток. Положительный результат не свидетельствует со 100% точностью о предраковом или раковом состоянии.

Вирус паппиломы также становится причиной изменения структуры эпителия и образования на его поверхности доброкачественных возвышений – остроконечных кондилом. По этой причине женщины, страдающие от ВПЧ, должны 2 раза в год проходить онкоцитологию.

Мазок на онкоцитологию — это исследование, которое показывает наличие атипичных клеток, но не всегда свидетельствует о развитии рака. После получения таких результатов специалист рекомендует повторить исследование, а также пройти через кольпоскопию и биопсию. Если диагноз подтвержден, подбирается эффективное лечение, которое соответствует стадии болезни.

При этом практика показывает, что рак шейки матки встречается не так часто, а негативное заключение мазка получает большое количество женщин. Из-за этого рекомендуется не паниковать, а пройти полное обследование. В идеале следует пересдать анализ в различных клиниках, чтобы получить достоверное представление о состоянии собственного здоровья.

Расшифровка результатов

Жидкостная цитология разрешает определить различные патологии даже на начальных стадиях. Ниже приведены расшифрованные значения анализа.

Выделяют пять уровней развития болезни. На результате они описаны цифрами1-5.

1. Клетки в норме, патологий нет.
2. Эта стадия характеризует возможное воспаление в шейки матки. После этого женщину направляют на дополнительное исследование.
3. В отдельных клетках выявлены изменения. Рекомендуют сделать цитологию еще раз.
4. Видоизменения в клетках свидетельствуют о предраковом состоянии шейки матки.
5. Высокий показатель атипичных клеток. Это говорит о первой стадии рака.

При дешифровке жидкостной цитологии используют аббревиатуру.

• ASC-US. Модификация плоских клеток эпителия.
• AGC. Показатель воспалений во влагалище.
• LSIL. Атипичные видоизменения в клетках, которые не свидетельствуют о раке.
• ASC-H. Подтверждает дисплазию или предраковое положение.
• HSIL. Эта аббревиатура говорит об онкологии.
• AIS. Рак.

Как проводится жидкостная цитология

В настоящее время в клинической практике используются несколько технологических вариантов жидкостной цитологии. Наиболее известной и востребованной из них является Becton Dickinson (BD) Sure Path, которая была одобрена FDA в США в 1999 году, с 2004 года официально одобрена NICE в Великобритании. С этого времени она активно внедряется в повседневную клиническую практику в странах Европы, РФ и ближнего зарубежья.

Основными этапами этого исследования являются:

1. Забор материала. Для этого используется специально разработанная комбинированная цитощетка особой конструкции. Ее аккуратно вводят в цервикальный канал, после чего совершают вращательные движения (2 против движения часовой стрелки и 3 по ее ходу). Это обеспечивает максимально возможное и при этом малотравматичное получение поверхностно расположенных клеток слизистой оболочки шейки матки – с ее влагалищной части, из цервикального канала и прилегающих участков влагалища. Такая манипуляция не требует анестезии, ведь испытываемые женщиной ощущения не превышают болевой порог.
2. Помещение цитощетки с полученным материалом в специальную пробирку (флакон) с особой жидкостью, что и дало название методике. Такая среда не только обладает консервирующими и стабилизирующими свойствами, но и способствует образованию суспензии с равномерным распределением клеток и других элементов по всему объему. Пробирки транспортируются в лабораторию, имеющую лицензию на проведение жидкостной цитологии и соответственно оснащенную.
3. Автоматизированная подготовка цитопрепарата. Включает вакуумную фильтрацию порции суспензии из пробирки, центрифугирование, нанесение полученного клеточного осадка равномерным слоем на стекло-слайд, окраску по методу Папаниколау с использованием влажной фиксации.
4. Микроскопия цитопрепарата. ПАП-тест на основе жидкостной цитологии осуществляется по тем же принципам, что и в случае традиционной методики. Но при этом учитываются особенности окраски, положения и размеров клеток после влажной фиксации цитопрепарата. Именно поэтому исследование может проводиться только прошедшим специальное обучение сертифицированным врачом-лаборантом.

Расшифровка результатов анализа производится только гинекологом или онкологом. Ответ из лаборатории может быть получен через 5-10 дней после забора материала. Но нередко этот срок удлиняется до 2-3 недель. Скорость получения ответа зависит от времени транспортировки, загруженности лаборатории и способа информирования поликлинического звена о данных проведенных исследований. При необходимости проводят экспресс-исследование, в этом случае врач узнает результат уже в течение первых 24 часов.

Схема проведения жидкостной цитологии шейки матки

А что после исследования?

Период восстановления после жидкостной цитологии принципиально не отличается от такового при взятии обычного мазка на онкоцитологию или биопсии шейки матки. В течение 1,5 недель рекомендуется выдерживать половой покой, отказаться от использования вагинальных тампонов и спринцеваний. В первые дни после теста допустимы необильные кровянистые выделения из влагалища, поэтому женщине желательно пользоваться гигиеническими прокладками.

Повышение температуры тела, продолжительные или обильные кровянистые выделения, боли внизу живота – тревожный признак. Появление таких симптомов требует скорейшего обращения к врачу.

Длительность ожидания результатов

Длительность проведения самого анализа может быть различна и зависит от определяемых заболеваний. При необходимости проводят экспресс-анализ, который занимает около суток. В этом случае не будут рассматриваться специфические инфекции, а только нормы дисплазии. Для более полного анализа потребуется длительный срок с применением различных растворов. Тогда это может занять от 5 до 14 дней.

Результаты жидкостной онкоцитологии будут готовы в течении 5-14 дней

Чтобы не волноваться необходимо сразу узнать у врача, когда будет готов анализ, так как он составляет карту пробы и знает сроки изготовления препаратов.

Жидкостная онкоцитология — это новейший метод исследования на онкологические изменения, происходящие в шейке матки и верхних половых органах. Однако применяется он не во всех медицинских учреждениях, а только в частных клиниках и крупных больницах. Это связано с дороговизной материалов и сложностью проведения. Но полученные результаты более достоверны, что является неоспоримым преимуществом данного вида цитологии.

https://youtube.com/watch?v=wVo7gV69394

Жидкостная цитология: норма

В норме микрофлора должна находиться в здоровом состоянии, патологические изменения отсутствовать. Размер, форма, структура клеток должны соответствовать стандарту. Так можно описать материал, который изъят из цервикального канала:

• Цилиндрический эпителий является однослойным и многослойным. Многослойный эпителий чаще всего обнаруживается в переходном участке влагалища.
• В норме эпителий может быть многослойным, но при условии, что отсутствуют другие изменения.
• Как уже было сказано, при имеющемся воспалении некоторые изменения клеток абсолютно нормальны. О чем еще может говорить соскоб шейки матки? Жидкостная цитология может обнаружить и другие изменения.

Бывает и такое, что изменения есть, но они носят доброкачественный характер. Это уже не норма, но и пока не патология, опасная для жизни. Онкологический центр пока посещать необязательно.

На руки женщина получает бланк, где указаны ее фамилия, время забора материала и другие сведения:

• тип применяемого препарата и разновидность онкоцитологии;
• качество препарата – адекватное или неадекватное;
• описание образца – негативное или перечень изменений.

Если обнаружены патологии, они расписываются. Когда выявлены воспалительные процессы, указывается вид бактерии, которая спровоцировала изменения. Злокачественные клетки отмечаются аббревиатурами – ASC или AGS. ASC – это атипичные плоские клетки, AGS – это атипичные железистые клетки. Обязательно указывается степень дисплазии и другие характеристики имеющихся изменений.

Также существует другой вариант трактовки информации:

1. Норма. Все клетки полностью соответствуют показателям.
2. Присутствие воспаления, которое искажает результаты.
3. Дисплазия 1-3 степени. Имеются единичные атипичные клетки, а для получения дополнительных сведений требуется кольпоскопия и биопсия.
4. Обнаружены единичные клетки с признаками злокачественного перерождения.
5. Большое количество злокачественных клеток, риск ракового заболевания высокий.

Даже при получении положительного заключения с большим количеством злокачественных клеток нельзя отчаиваться. Требуется дополнительное обследование, после чего ставится окончательный диагноз и подбирается лечение.

При дисплазии первой степени не стоит сразу соглашаться на биопсию, так как диагноз может быть ложным. Рекомендуется повторить процедуру через 3-6 месяцев, а уже затем принимать дальнейшие действия.

Для этого не должно быть выявлено атипичных клеток, а лейкоциты в поле видимости не превышают 15. В области влагалища, шейки матки и мочеиспускательного канала содержится не более 10 элементов.

В бланке исследуемый получает сведения следующего характера:

1. Уровень чистоты половых органов соответствует 1 или 2, что обозначает нормальную микрофлору.
2. C – результаты мазка из цервикального канала, U – из уретры, V – из влагалища.
3. Количество клеток эпителиальной ткани, которых в норме не должно быть больше 10 единиц.
4. Уровень лейкоцитов.
5. Заболевания, передающиеся половым путем, требующие срочной терапии.
6. Количество слизи, которая содержится в минимальном количестве у каждой девушки.
7. Количество эпителиальных клеток различных видов. При отклонении от нормы каждый вид аномальных клеток имеет свою собственную аббревиатуру.

Техника проведения

Цитология шейки матки считается обязательной процедурой комплексного гинекологического осмотра. Это стандарт, который позволяет своевременно выявить риски многих заболеваний, включая онкологические.

Гинеколог производит соскоб с внешнего участка шейки матки (экзоцервикса), а также с поверхности слизистой влагалища специальным шпателем (шпатель Эйра). Клетки канала шейки (цервикального канала) забирают с помощью эндобраша — цервикального зонда, что позволяет получить достаточное количество информативного материала.

Также врач может использовать такие инструменты для забора клеточного материала:

• Для мазка заднего свода шейки — шпатель Эйра.
• Аспирационный инструмент — спиретте, для забора эндоцервикального материала.
• Скринет также предназначен для забора биологического материала из цервикального канала.
• Cervex-Brush — стерильная медицинская щеточка для забора мазка с T-зоны (поверхности шейки и цервикального канала).
• Стандартный пинцет.
• Гинекологическое зеркало.
• Цервикальная двухсторонняя ложка (ложечка Фолькмана) для мазка на микрофлору слизистой цервикального канала и определения инфекционных заболеваний.

Все современные инструменты являются стерильными, большинство из них используются индивидуально для каждой женщины.

Техника проведения цитологии:

• Осмотр на гинекологическом кресле с помощью зеркал, в это же время производится забор материала на цитологию. Стенки влагалища расширяют, процедура мазка (соскоб) может доставить кратковременный легкий дискомфорт, но чаще всего цитология проходит безболезненно.
• Одновременно с проведением соскоба забирается и материал для бактериологического исследования (микрофлора). Совместно с цитологией может проводиться кольпоскопия, но это бывает только по показаниям, обычно эту процедуру назначают отдельно.
• Образцы материала наносятся на специальное стекло, закрепляются, фиксируются и передаются лаборанту для проведения точного микроскопического исследования с помощью окрашивания. Существует и новый метод цитологии шейки матки — жидкостный (ThinPrep), в этом случае материал помещается в колбу и также передается в лабораторию.

Очень важна маркировка анализа. В лабораторию должно поступать стекло с материалом и специальным бланком, где указываются такая информация:

1. Номер стекла в соответствии с номером направления бланка.
2. Название медицинского учреждения, где проводилась процедура.
3. Дата анализа.
4. ФИО пациента.
5. Возраст пациента.
6. Числа, даты последнего менструального цикла.
7. Предварительный (клинический) диагноз.