Сколько делается серологический анализ крови

Исследование серологического анализа крови

Серология-это раздел иммунобиологии, изучающий взаимоотношение антигенов и антител в сыворотке (serum) крови животных и человека. Серологический анализ крови — это современный метод анализ, проводимый для распознавания инфекционных заболеваний и нарушений работы иммунной системы организма.

Проведение серологического анализа делает возможным определение причины болезни. С помощью реакций serum определяют группы крови, тестируют компоненты на совместимость перед процедурой переливания крови, контролируют эффективность вакцин.

Задачей серологии является разработка и производство диагностических и лечебных сывороток.

В серологии используют следующие реакции:

• склеивания (агглютинации);
• осаждения (преципитации);
• уничтожения (нейтрализации);
• обнаружения активированных белков (связывания комплемента);
• использование меченых антигенов или антител в крови.

Типы исследований

Многих интересует вопрос: серологический анализ крови-что это? Это диагностика заболеваний при помощи серологических реакций (seroreaction), иначе говоря, процесс взаимодействия антигенов и антител.

Существует два типа исследования серум или два пути диагностики заболевания с помощью seroreaction: В первом случае к серум добавляют антиген известного болезнетворного фактора и определяют титр антител.

То есть, степень готовности организма бороться с фактором, вызывающим заболевание.

Во втором случае к серум добавляют антитела для обнаружения антигена болезнетворного фактора. То есть, проник ли болезнетворный фактор в кровь пациента.

Серологический анализ крови применяют в тех случаях, когда необходимо провести дифференциальную диагностику заболевания. Только в том случае, когда установлена причина патологии, врач сумеет назначить соответствующий курс лечения.

Потому, что против каждого возбудителя болезни существуют специфические лекарственные средства.

Серологический анализ

Преимущества и недостатки

Сильными местами иммуноферментного анализа является диагностика патологий на ранних стадиях, проведение постоянного контроля за развитием заболевания и за динамикой результатов лечения. Время ожидания результата исследования невелико, достоверность высока, стоимость серологического анализа невелика, а в предварительной подготовке пациента к процедуре нет необходимости.

Слабым местом иммуноферментного анализа является необходимость частого контрольного тестирования крови во избежание получения ложноотрицательного результата.

Иммуноферментный анализ успешно применяется при диагностике показателей аллергий различной этиологии, инфекций вирусного происхождения, инфекций гениталий, нарушений в работе органов внутренней секреции.

Преимущества и недостатки присущи всем методам исследований. Но, у ИФА крови сильных мест больше, чем слабых.

Расшифровка

Расшифровка анализа крови проводится врачами-лаборантами и сводится к обнаружению либо положительного результата, либо его отсутствия.

Например, при проведении реакции преципитации, осадок либо есть, либо его нет.

Результаты анализов помогают врачам-клиницистам, ставить и уточнять диагноз болезни, назначать лечение и контролировать состояние пациента в процессе заболевания и выздоровления.

Серологические исследования подтверждают или опровергают предварительный диагноз, основанный на симптоматике. В случае подтверждения диагноза, исследования повторяют для изучения динамики титра антител, что позволяет судить о развитии или редукции заболевания.

Для здорового человека, нормальным является полное отсутствие антител. А, если таковые обнаружены, необходимы дополнительные исследования.

Применение иммуноферментного анализа

В клинике ИФА широко применяют для определения возбудителей вирусных гепатитов, ВИЧ-инфекции, сифилиса, хламидий и паразитов. Спектр возможностей исследования неограничен. Диагностика инфекций этим методом имеет ряд достоинств и недостатков. Поговорим о них подробнее.

• ИФА позволяет выявить болезнь на ранней стадии. Например, при диагностике Лайм-боррелиоза антитела образуются через месяц после инфицирования, а клиническая картина может развиться спустя месяцы и годы.
• ИФА дает высокую точность. Выявить комплекс «антиген-антитело» удается в 90% случаев.
• ИФА остается довольно простым и дешевым методом исследования. Примерная цена услуги зависит от вида анализа и варьируется в пределах 300-700 рублей. Немного дороже обойдется количественный анализ – 600-1300 рублей.
• ИФА за счет своей простоты и дешевизны часто используется как метод скрининга. С его помощью удается вычислить переносчиков заболеваний среди обширной популяции.
• ИФА проводится довольно быстро, ответ не заставит себя ждать.

Однако, при всех достоинствах методика иммуноферментного анализа несовершенна и часто используется в сочетании с другими способами диагностики. Результаты анализа могут быть ложноположительными (часто наблюдается при наличии ревматологических и аутоиммунных болезней) и ложноотрицательными (при сильном иммунодефиците). Тогда диагностика инфекционных заболеваний переходит на молекулярный уровень. Про него расскажем ниже.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР диагностика инфекций была создана в конце 20 века. Этот метод позволяет находить генетический материал возбудителя болезни даже в капле крови. Также можно исследовать мочу, мокроту, смывы из носоглотки и любые другие биологические объекты.

Какие возбудители чаще всего нуждаются в ПЦР-диагностике? В клинике полимеразную цепную реакцию используют для подтверждения диагноза СПИД, инфекционный гепатит, папилломавирус, хламидиоз, токсоплазмоз, микоплазмоз, уреаплазмоз. Но при желании с помощью ПЦР можно определить наличие любой инфекции.

Расшифровка качественного анализа не требует медицинского образования. Если ДНК (РНК) возбудителя обнаружена в крови (соскобе, моче и т.д.), то диагноз подтверждается. Количественный анализ трактуется только врачом. В целом метод быстр, прост и удобен. Цена на такой вид анализа остается приемлемой. Например, диагностика инфекционных гепатитов варьируется от 400-800 рублей, половые инфекции можно определить за 300-500 рублей.

Перед проведением любого анализа проконсультируйтесь с врачом. Только доктор подскажет вам быстрый путь определения инфекции. Удачи!

Будьте бережны и внимательны к своему здоровью – выберите подходящего вам врача и запишитесь на приём по телефону: 8 (499) 969-20-36 (для жителей Москвы и Московской области).

Серологические реакции – что это?

При лабораторной диагностике большинства инфекционных заболеваний используется способ выявления в крови пациента антител, вырабатываемых на антигены возбудителя. Они используются во врачебной практике с начала двадцатого века. С развитием науки современные врачи научились определять антигены в структуре микробов, а также выявили химическую формулу их токсинов. Это дало возможность разработать сыворотки, предназначенные не только для излечения, но и диагностики инфекционных заболеваний. Сыворотки производят путем введения лабораторным животным ослабленных возбудителей. Постановка серологических реакций сейчас очень популярна.

По истечении нормативного времени выдержки из крови лабораторных животных делают препараты. Их используют при серологических реакциях для идентификации микробов или их токсинов. Метод основан на иммунной реакции человеческого организма. Данное исследование применяют в диагностике заболеваний инфекционного характера, чтобы выявить наличие или отсутствие антител у пациента к каким-либо вирусам или бактериям, а также для того, чтобы определить группу крови. Внешние проявления серологических реакций зависят от условий проведения и того состояния, в котором находятся антигены в крови пациента. Если микробы не растворяются, то они выпадают в осадок, лизируются, связываются или иммобилизуются в сыворотке. Если происходит растворение антигенов, то выявляют феномен нейтрализации или преципитации. Серологические реакции применяются давно.

Действия при положительном и сомнительном результате анализа

Положительная и ложноположительная реакция Вассермана при беременности и не только – своего рода толчок для проведения комплексного исследования состояния организма.

При результате с различной степенью положительности, следует пройти еще 2 исследования, похожих на анализ крови rw, для подтверждения или опровержения наличия сифилиса:

• Реакция иммунофлюоресценции, сокращенно «РИФ». Данная процедура определяет наличие трепонем на ранней стадии заражения. Путем подсадки возбудителя к забранной крови человека, наблюдения за реакцией на подсветку можно определить наличие болезни. Если содержимое пробирки начнет светиться – значит сифилис подтверждается.
• Реакция иммобилизации бледных трепонем, аббревиатура «РИБТ». Такое исследование точно отличит ложноположительный результат от других видов, подтвердит или опровергнет положительный анализ крови на рв.

При повторном анализе и утверждении диагноза «Сифилис» необходимо незамедлительно начать лечебные мероприятия. Такое венерическое заболевание поддается излечению на первичной стадии.

На последующих стадиях течения заболевания, благодаря лекарственным препаратам, можно поддерживать стабильность состояния здоровья и не допускать дальнейшего развития заболевания.

Дабы исключить столь неприятные последствия для новорожденного, беременность протекает под строгим контролем целой группы специалистов. Проводятся различные мероприятия по профилактике передачи заболевания младенцу. Реакция Вассермана при беременности проводится регулярно, дабы исключить ошибочный результат.

Сразу после рождения ребенка, врачи визуально осматривают плаценту на наличие мест поражения инфекцией, оценивают ее плотность. При низкой плотности плацентарной ткани, ее часть может остаться в организме роженицы. Это грозит неприятными последствиями и осложнениями, а так же требует срочной чистки детородных путей.

Спустя 14 дней после родов, роженицу и ребенка подвергают ряду анализов на уровень состояния здоровья, наличие заболевания и нарушений в развитии младенца. Начальные 12 месяцев жизни ребенок состоит на учете венеролога, регулярно проходит анализ крови на rw и профилактических мероприятий. По мере взросления, раз в несколько лет проводятся повторные исследования.

Что такое анализ крови на rw необходимо знать каждому человеку для обеспечения безопасного сосуществования с носителями заболевания, а так же самодиагностики на наличие сифилиса.

Общий анализ

Данное исследование назначается не только в профилактических целях. С его помощью лечащий врач может отслеживать динамику изменений при имеющемся заболевании. Общий анализ крови – вид исследования жидкой соединительной ткани, являющийся самым распространённым. Забор биоматериала, как правило, осуществляется из пальца, но может и из вены. Благодаря данному виду анализа крови врач получает информацию о состоянии здоровья пациента в общем. Кроме того, у него имеется возможность спрогнозировать появление тех или иных заболеваний.

Кровь состоит из плазмы и форменных элементов. Её химический состав практически всегда одинаков. Но при возникновении какой-либо патологии показатели начинают меняться. В этом случае дополнительно назначаются другие виды анализов крови – из пальца или из вены.

В ходе исследования определяются значения:

1. Гемоглобина. Он играет важную роль в транспортировке кислорода из лёгких в каждую клетку организма.
2. Эритроцитов. Данные форменные элементы содержат гемоглобин. Снижение их количества свидетельствует о малокровии.
3. Цветового показателя – параметра, предоставляющего информацию об относительном содержании гемоглобина в 1 эритроците.
4. Ретикулоцитов. Это незрелые эритроциты с остатками РНК. Они показывают скорость образования красных кровяных телец.
5. Тромбоцитов. Играют важную роль в процессе свёртывания крови. Отклонение показателя от нормы свидетельствует о его нарушении.
6. Скорости оседания эритроцитов. Увеличение данного параметра – признак наличия какой-либо патологии.
7. Лейкоцитов. Их задача – борьба с вирусами и бактериями. Увеличение их количества говорит о воспалительном процессе.
8. Нейтрофилов, уничтожающих патогенные микроорганизмы при их проникновении в организм.
9. Эозинофилов. Их увеличение может свидетельствовать о наличии заболевания аллергического или паразитарного характера.
10. Базофилов. Они препятствуют распространению аллергенов.
11. Лимфоцитов – клеток, отвечающих за приобретённый иммунитет.
12. Моноцитов. Они являются мощной защитой организма от болезнетворных микроорганизмов.

Перед данным видом анализа крови рекомендуется:

Методы проведения СИ

Серологические анализы подразделяются на количественные и качественные. Качественные дают однозначный ответ о наличии или отсутствии в организме антител (Ат), антигенов (Аг). Количественные результаты отображаются в виде чисел со знаками + в количестве от 1 до 4. Самые распространенные в современной медицине методы СИ:

1. Агглютинация. Основана на принципе связывания Ат, Аг; что дает выпадение хлопьеобразного осадка в сыворотке.
2. Гемагглютинация. Применяются адсорбированные эритроциты.
3. Преципитация. Образование помутнения от связки Аг с Ат.
4. Коагглютинация. Выявление негативных антигенов при сывороточном введение антител, широко распространена адсорбция на белке стафилококка.
5. Подавление гемагглютинации. Подавление соединительной функции Аг со свободными эритроцитами.
6. Непрямая реакция Кумбса. Определение антител к антигенам эритроцитов.
7. Кольцепреципитация. Наслоение антигенов на лечебную сыворотку.
8. Двойная радиальная иммунодиффузия. Проникновение антигенов в лунки агар-агар питательной среды, растворенной в сыворотке
9. Реакция связывания комплемента. Индикатор – эритроциты барана в гемолитической сыворотке, который сигнализирует о смешивании предполагаемых Аг и Ат иммунитета.
10. Нейтрализация вирусов родными антителами.
11. Маркирование Ат и Аг флуоресцентным или ферментным составом. Иммунофлюоресцентный РИФ, иммуноферментный ИФА методы.

В сложных случаях – неясной клинической картине, высокой пандемичности и молниеносном распространении инфекции, специалистами лаборатории может быть принято решение о проверке одного показателя несколькими разными методами.

Обратите внимание! 

Серологический анализ крови является инструментом подтверждения или опровержения диагноза, но никак не способом первичной постановки.

Норма референтных показателей для каждого из методов подбирается индивидуально, зависит от пола, возраста, физиологического состояния больного. обследуемой болезни.

Иммунофлюоресцентный и иммуноферментный методы

Антитела, помеченные светящимся раствором, вводятся в сыворотку. В качестве меток чаще всего применяют флуороционат, который придает клеткам зеленое свечение под ультрафиолетовой лампой. Результат анализа качественный, базируется на яркости свечения. РИФ проводят прямым, непрямым методами, при котором сначала вводят обычные АТ, а затем маркированные для избежания неспецифической реакции цепи.

Метод ИФА основан на выявлении антител, антигенов путем маркирования ферментом какой-либо клетки. В результате химических реакций образуются окрашивания сыворотки в зависимости от того, есть ли злокачественные Аг и какие именно. В свою очередь, ИФА подразделяется на гомогенный и гетерогенны способ. Гомогенно исследуют в жидком растворе, а гетерогенно на твердой основе.

Что такое реакция Вассермана?

Реакция Вассермана — реакция связывания комплимента

Реакция Вассермана — это метод обнаружения в сыворотке крови обследуемого человека белков-антител к бледной трепонеме (возбудителю сифилиса). Реакция Вассермана относится к методам, часто имеющим недостаточную специфичность, потому во многих современных клинических лабораториях она заменена на более современную — антикардиолипиновый тест.

Бледная трепонема, антитела к которой обнаруживаются в ходе реакции Вассермана, при попадании в организм человека вызывает тяжелое системное заболевание — сифилис. Сложность его диагностики заключается в многообразии появляющихся симптомов, которое вызвано поражением практически всех систем и органов больного. Сифилис как бы «маскируется» под видом совершенно не связанных с инфекцией заболеваний — неврологических болезней, заболеваний сердца, костно-мышечной системы или кожи.

Сложность клинической диагностики сифилиса привела к тому, что практически все пациенты, поступающие в больницы для планового или экстренного лечения, обследуются при помощи реакции Вассермана или ее аналогов. Кроме того, обязательному исследованию крови подвергаются и беременные, это связано с тем, что сифилис будущей матери приводит к грубым нарушениям развития плода. Дети, родившиеся у больных женщин, оказываются также инфицированы бледной трепонемой еще внутриутробно, у них сифилис протекает в гораздо более сложной для лечения форме. К счастью, своевременная диагностика позволяет выявить инфицирование на самых ранних стадиях как у женщин, так и у мужчин, а вовремя начатое лечение — залог полного выздоровления от сифилиса.

Расшифровка биохимического анализа крови

Кровь с вены для сдачи анализа на биохимию рекомендуют брать только утром, и перед этим пациент 8 – 10 часов не должен употреблять пищу. По сданному биохимическому анализу врач судит о том, какие воспалительные процессы происходят в организме больного, есть ли нарушение процентного содержания микроэлементов.

Существуют определенные нормы анализа:

1. Общий белок: 62 – 87 г/л.

Если белок отклонен от нормы – присутствует ревматизм или онкология.

Глюкоза: 3,1 – 5,4 ммоль/л.

Повышен показатель сахара – склонность к заболеванию сахарным диабетом.

Азот мочевины: 2,4 – 8,4 ммоль/л.

Повышен показатель остаточного азота – присутствует сердечная недостаточность, опухоль, болезнь почек.

Креатинин:

Для женщин: 52 – 98 мкмоль/л.

Для мужчин: 60 – 116 мкмоль/л.

Повышение показателя – излишнее употребление мясных продуктов, обезвоживание, гипертиреоз.

Снижен показатель при заболеваниях печени.

Холестерин: 3,4 – 6,5 ммоль/л.

Повышение нормы – проблема с печенью и с сердечно — сосудистой системой.

Билирубин: 5,0 – 20,0мкмоль/л.

Повышение показателя говорит о наличии гепатита.

Альфа-Амилаза:

Дети новорождённые и до двух лет: 5,0 – 60 ед/л.

Дети старше двух лет и взрослые: 25 – 130 ед/л.

Повышение нормы при панкреатите.

АлАт (АЛТ):

Для женщин: до 30 ед/л.

Для мужчин: до 42 ед/л.

Повышение показателя при нарушении работы печени.

Альфа-Липаза:27 – 100 ед/л.

Повышенный показатель при наличии сахарного диабета, почечного заболевания, перитонита.

Снижен показатель при гепатите.

Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ):

Для женщин: до 48,5 ед/л.

Для мужчин: до 33,4 ед/л.

Повышение нормы – болезнь печени, заболевание поджелудочной железы.

Аспартатаминотрансфераза (АСАТ): до 38 ед/л.

Превышение – произошло повреждение сердечной мышцы, присутствует церроз печени.

Фосфатаза:

Для женщин: до 245 ед/л.

Для мужчин: до 275 ед/л.

Превышение нормы – инфаркт легких, почек, наличие метастаз рака костей.

Методы проведения серологического исследования.

В серологии может применяться большое число методов

Все методики определения комплексов антиген-антитело (Аг-Ат) основываются на использовании известного Аг либо Ат в поиске неизвестного. Если необходимо обнаружить Аг, необходимы диагностические иммунные сыворотки с содержанием специфических Ат. Если целью СИ является выявление Ат, используются диагностикумы — взвеси, содержащие определённые Аг.

Серологические анализы могут отражать качественный либо количественный результат. При качественном исследовании итог может быть отрицательный или положительный, то есть искомый элемент либо обнаружен, либо нет. Количественный итог выражается в виде числового значения либо знаками «+» (обычно от одного до четырёх).

Непрямая гемагглютинация — один из методов диагностики

Методы серологических исследований:

• Агглютинация. Связывание Ат с Аг с последующим формированием хлопьев либо осадка. Применяются прямые, непрямые, развёрнутые, ориентировочные реакции, позволяющие выявить антитела в сыворотке.
• Гемагглютинация. Используются эритроциты с адсорбированными на них Аг либо Ат, которые склеиваются с соответствующими Ат и Аг. Образуемые комплексы выпадают в виде фестонного осадка.
• Преципитация. Образование комплекса Аг-Ат с последующим осаждением в виде помутнения, именуемого преципитатом.
• Коагглютинация. Выявление Аг при помощи Ат, адсорбированных на белке клеток стафилококка.
• Торможение гемагглютинации. Ат иммунной сыворотки подавляют вирусные Аг, в итоге вирусы теряют способность склеиваться с эритроцитами.
• Непрямая реакция Кумбса. Определяются Ат к поверхностным Аг эритроцитов.
• Кольцепреципитация. Проводится на основе иммунной сыворотки с наслоением растворимого Аг.
• Двойная радиальная иммунодиффузия. Реакция основана на диффундировании компонентов антисыворотки и Аг в лунках агара либо агарозы.
• Реакция связывания комплемента. Связь Аг и Ат сопровождается адсорбцией комплемента, в качестве индикатора используются эритроциты барана и Ат к ним в составе гемолитической сыворотки.
• Нейтрализация. Основана на нейтрализации вирусного агента антителами.
• Реакции, основанные на маркировании Ат и Аг флуоресцентным либо ферментным составом — иммунофлюорисцентный (РИФ) и иммуноферментный (ИФА) методы.

Расшифровка

Расшифровкой серологических анализов занимается врач из лаборатории. Каждый класс иммуноглобулинов вырабатывается на определенном этапе развитии патологии, поэтому удается с высокой точностью установить ее стадию:

• высокое содержание иммуноглобулинов A указывает, что с момента инфицирования прошло несколько месяцев;
• повышенный уровень иммуноглобулинов M свидетельствует о длительном течении заболевания или его обострении на фоне резкого снижения иммунитета;
• увеличение уровня иммуноглобулинов G наблюдается, если человек заражен или у него выработался иммунитет к патогенам. При вторичном инфицировании они будут незамедлительно уничтожены.

Результаты могут быть ложноотрицательными или ложноположительными из-за длительной антибиотикотерапии, наличия аутоиммунных заболеваний, включая ревматоидный артрит, анкилозирующий спондилоартрит, системную красную волчанку. А также при тяжелых патологиях печени, органов мочевыделения, любой формы туберкулеза. Ложноположительные результаты нередко спровоцированы беременностью вследствие изменения гормонального фона, недавней вакцинацией из-за присутствия в крови антител к введенным патогенам.

Серологическое исследование и расшифровка результатов редко длятся более суток. Современные лаборатории оснащены всем необходимым оборудованием для осаждения кровяных телец, отделения фракций, выполнения качественных и количественных биохимических реакций. Скорость выполнения анализа зависит от метода его проведения.

Реакция связывания комплемента

Реакция гемолиза.

Реакция гемолиза (РГ) –это разрушение эритроцитов при действии антител при участии комплемента.

Компоненты РГ.

1. Антиген – 3% взвесь эритроцитов на изотоническом растворе хлорида натрия;

2. Антитело – гемолитическая сыворотка – сыворотка, содержащая антитела к эритроцитам (гемолизины);сыворотку получают путем иммунизации кроликов эритроцитами барана;

3. Комплемент – система белков крови, которые адсорбируюся на комплексе антиген-антитело и формируют мембраноатакующий комплекс, который разрушает антиген, т.е. разрушает эритроциты или, по-другому, вызывает лизис эритроцитов (гемолиз). В качестве комплемента используется свежеприготовленная сыворотка крови морских свинок.

Если в пробирку поместить в определенных количествах эритроциты, гемолитическую сыворотку и комплемент, то в течение нескольких минут произойдет разрушение (гемолиз) эритроцитов, в результате чего смесь из темно-красной станет розовой (“лаковая кровь”).

Реакция гемолиза используется в качестве индикатора при постановке реакции связывания комплемента.

Реакция связывания комплемента (РСК)– это сложная серологическая реакция, в которой участвуют 2 системы антиген-антитело и комплемент. 1-ая система – специфическая, 2-ая – гемолитическая система.

Видимого эффекта при этом не наблюдается, поэтому для выявления связывания комплемента (а следовательно, и для выявления образования комплекса антиген-антитело при их соответствии друг другу), т.е.

в качестве индикатора используется 2-ая – гемолитическая система.

РСК используется чаще для серодиагностики (обнаружения антител к возбудителю заболевания в сыворотке крови больного) гонореи, сифилиса, коклюша, сыпного тифа и др. риккетсиозов и многих вирусных заболеваний.РСК также используется для сероидентификации.

Компоненты РСК.

1. Антиген– экстракты микробов, гаптены, реже – взвесь микробов, т.е. антиген может быть как корпускулярным (нерастворимым), так и молекулярным (растворимым).

2. Антитело – сыворотка крови больного человека (при серодиагностике) или иммунная диагностическая сыворотка, содержащая известные антитела (при сероидентификации).

3. Эритроциты барана – антигены гемолитической реакции.

5. Комплемент– свежеприготовленная сыворотка крови морских свинок (жидкая или лиофильно высушенная).

6. Электролит – изотонический раствор хлорида натрия.

Постановка РСК.

Перед постановкой опыта антиген, сыворотка больного, гемолитическая сыворотка и комплемент титруются (определяется их титр). Сыворотка больного прогревается при 56°С в течение 30 мин.

РСК проводят в 2 фазы.

I фаза – специфическая: в одной пробирке готовят специфическую систему – смешивают равные количества известного антигена, сыворотки больного и комплемента, в другой пробирке готовят гемолитическую систему – смесь эритроцитов барана и гемолитической сыворотки, пробирки ставят в термостат при 37°С на 30 мин. Одновременно готовят контроли на антиген, комплемент и гемосистему, контрольные пробы с сывороткой заведомо больного человека (положительная сыворотка) и заведомо здорового человека (отрицательная сыворотка) и также помещают в термостат на 30 мин.

II фаза – индикаторная: в исходную смесь и во все контрольные пробирки добавляют одинаковые количества гемолитической системы и учитывают результаты реакции после выдерживания в термостате 30 мин.

Учет результатов РСКпроводятпри безупречных результатах в контролях.

Положительная реакция(человек болен и в его сыворотке имеются соответствующие антитела к возбудителю заболевания – антигену): в I фазе в специфической системе образуются комплексы антиген-антитело, с которыми связывается комплемент, после добавления гемолитической системы во II фазе гемолиз не наблюдается, так как комплемент связан 1-ой специфической системой. Видимый эффект– образование осадка эритроцитов.

Отрицательная реакция(человек здоров и в его сыворотке нет антител к возбудителю заболевания): комплексов антиген-антитело не образуется и комплемент в I фазе остается свободным, после добавления гемолитической системы во II фазе комплемент связывается с обязательно имеющимися здесь комплексами антиген-антитело (это комплексы эритроциты-антиэритроцитарные антитела) и вызывает гемолиз эритроцитов. Видимый эффект – гемолиз эритроцитов – “лаковая кровь”.

В диагностике инфекционных заболеваний также используютсяреакция нейтрализация (РН) токсина антитоксической сывороткой, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), радиоиммунный анализ (РИА), иммуноферментный анализ (ИФА).

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Иммунологические исследования крови

Иммунологические реакции построены на взаимодействии антигена с антителом. В роли антигена может выступать все, что угодно – любые чужеродные вещества органической (в основном, углеводной или белковой) и неорганической структуры. Антигенами являются бактериальные, вирусные токсины, пища, лекарства, фрагменты чужеродных тканей.Соответственно, иммунологические исследования используются для идентификации возбудителей инфекционных заболеваний, определения причин аллергии в каждом конкретном случае. Вполне логично, что эти исследования могут быть использованы и для оценки успешности лечения этих инфекционных и аллергических заболеваний.Некоторые серологические реакции предполагают обнаружение не антигена, а антител. Антитела — это специфические вещества, относящиеся к классу иммуноглобулинов, которые вырабатываются иммунной системой на тот или иной антиген. Соответственно, по обнаружению антител можно судить, есть антиген в сыворотке крови, или его нет. К иммунологическим относятся и всем известные реакции определения группы крови и резус фактора.

Методика выполнения серологических реакций

В зависимости от поставленных задач в медицинской практике используется множество типов серологических реакций. Все они осуществляются in vitro – в пробирке. Для получения сыворотки берут кровь из вены утром, натощак. Накануне желательно отказаться от приема обильной жирной пищи, алкоголя.Для получения сыворотки полученную кровь центрифугируют. В дальнейшем, для проведения реакций, кровь или сыворотку смешивают с заданным материалом. В роли этого материала может выступать другая сыворотка, эритроциты (человеческие, бараньи), микробная культура или какая-либо иная среда, содержащая нужный антиген или антитело. Реакцию оценивают наглядно, по характерным изменениям, среди которых:

• Агглютинация – склеивание эритроцитов
• Преципитация – образование осадка при взаимодействии двух жидких сред
• Связывание комплемента – взаимодействие антигенов и антител с белками крови (комплементом), приводящее к гемолизу – разрушению эритроцитов.

Положительная реакция указывает на наличие исследуемого антигена, отрицательная – на его отсутствие. При исследовании крови на антитела используют такое понятие как титр – максимальное разведение сыворотки, при котором эти тела обнаруживаются. Чем больше разведение, тем выше титр.